全反式维甲酸和骨形态发生蛋白-9对骨肉瘤细胞143B细胞株增殖的影响

摘要

目的观察全反式维甲酸（ATRA）和骨形态发生蛋白-9（BMP-9）对骨肉瘤细胞143B细胞株增殖能力的影响。方法选择人骨肉瘤细胞143B细胞株作为研究对象分为ATRA组（单用ATRA）、BMP-9组（单用BMP-9）、联合组（联合应用ATRA和BMP-9）和对照组（二甲基亚砜）,采用噻唑蓝（MTT）和流式细胞仪分析细胞增殖,采用Western blot分析细胞增殖及不同组别处理方案之后143B细胞株BMP-9蛋白的表达。结果 ATRA组在10μmol/L浓度下24、48、72 h的增殖率为（94.1±1.6）%、（93.0±1.4）%、（86.5±1.7）%,在20μmol/L浓度下24、48、72 h的增殖率为（82.6±2.3）%、（76.5±2.1）%、（68.4±2.4）%,在40μmol/L浓度下24、48、72 h的增殖率为（72.4±3.5）%、（65.3±3.1）%、（60.2±2.2）%,在60μmol/L浓度下24、48、72 h的增殖率为（64.9±2.9）%、（53.7±4.1）%、（41.5±4.9）%,ATRA能够有效抑制143B细胞的增殖,呈浓度依赖性,且随着药物作用时间增加抑制作用增强（P=0.015）,浓度为20μmol/L时ATRA已经能明显抑制143B细胞的生长（P=0.009）;处理48h后,ATRA组在20μmol/L浓度下BMP-9mRNA表达水平和BMP-9蛋白表达水平分别为2.1±0.2、1.4±0.1;在40μmol/L浓度下BMP-9 mRNA表达水平和BMP-9蛋白表达水平分别为2.7±0.3、2.0±0.3;在60μmol/L浓度下BMP-9 mRNA表达水平和BMP-9蛋白表达水平分别为2.9±0.5、2.3±0.6,无论何种浓度下的ATRA组都会表现出143B细胞中BMP-9表达水平的增高（P=0.027）,且呈浓度依赖性;BMP-9组24、48、72 h的细胞增殖率为（117.4±3.5）%、（119.4±2.4）%、（116.9±3.0）%,ATRA组（40μmol/L）24、48、72 h的细胞增殖率为（72.4±3.5）%、（65.3±3.1）%、（60.2±2.2）%,联合组24、48、72 h的细胞增殖率为（51.2±2.4）%、（43.9±2.7）%、（36.5±4.1）%,BMP-9能够促进143B细胞的增殖（P=0.000）,但联合ATRA应用后被翻转,增强了ATRA的抗增殖效果。结论 ATRA能够抑制骨肉瘤143B细胞的增殖,同时上调内源性BMP-9水平,单独引入外源性的BMP-9会促进骨肉瘤143B细胞增殖,但联合应用ATRA和BMP-9则能够翻转BMP-9的作用,增强ATRA对143B细胞增殖抑制的效果。