微小RNA-10b靶向蛋白去乙酰化酶4调控雌激素受体阳性MCF-7乳腺癌细胞他莫昔芬耐药性

摘要

目的探讨微小RNA（miRNA,miR）-10b靶向蛋白去乙酰化酶4（HDAC4）调控雌激素受体阳性（ER+）MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药性。方法建立ER+且他莫昔芬耐药的MCF-7细胞株MCF-7-TR,实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测MCF-7细胞和MCF-7-TR细胞miR-10b表达水平。分别采用噻唑蓝（MTT）法和锥虫蓝法检测转染pre-miR-10b、miR-10b抑制物、siHDAC4的MCF-7细胞、MCF-7-TR细胞在不同他莫昔芬浓度下（0、5、10、15、20、30μmol/L）的增殖能力和活性。采用Western blot检测HDAC4蛋白表达情况。结果以MCF-7乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力作为标准,MCF-7-TR细胞乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力较MCF-7乳腺癌细胞分别为7.2±1.1和5.3±1.3。随着他莫昔芬浓度增加,各细胞增殖率均呈下降趋势,其中以MCF-7细胞最为明显,其次为MCF-7-TR+miR-10b抑制物+siHDAC4细胞以及MCF-7+pre-miR-10b+HDAC4细胞,而MCF-7-TR+siHDAC4细胞和MCF-7-TR细胞增殖率下降程度最低。MCF-7细胞和MCF-7-TR+miR-10b抑制物细胞的迁移能力下降最多,而MCF-7+pre-miR-10b+他莫昔芬（10μmol/L）细胞和MCF-7-TR+他莫昔芬（10μmol/L）细胞的迁移能力比较差异无统计学意义（t=1.116,P=0.272）,但显著高于MCF-7细胞和MCF-7-TR+miR-10b抑制物细胞（t=0.124、10.769、14.569、11.577,P均为0.000）。MCF-7+pre-miR-10b细胞HDAC4蛋白表达水平低于MCF-7细胞,MCF-7-TR细胞HDAC4蛋白表达水平MCF-7-TR+miR-10b抑制物细胞,MCF-7+siHDAC4细胞HDAC4蛋白表达水平低于MCF-7细胞。结论 miR-10b-HDAC4信号通路可能作为乳腺癌他莫昔芬耐药的一种分子机制。