蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂对大鼠RPE细胞α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

摘要

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)在大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞中的表达及其抑制剂原钒酸钠(SOV)对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法免疫荧光染色法观察PTP的3种典型亚型PTP1B、PTP-LAR及PTEN在大鼠RPE细胞中的表达;SOV与培养液共培养RPE细胞为实验组,正常RPE细胞为对照组。实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测PTP1B、PTP-LAR及PTEN基因表达的变化,免疫荧光染色法观察α-SMA在细胞中表达的改变。结果PTP1B在非融合和融合大鼠RPE细胞的细胞质和细胞核中均有明显表达,PTP-LAR在非融合细胞中以细胞核膜表达为主,而在融合细胞中主要表达于细胞质,PTEN未见明显表达。SOV孵育后PTP1B、PTP-LAR mRNA的表达量均明显下降(P0.05);免疫荧光检测发现,随着SOV浓度的增加α-SMA阳性细胞比例明显增加(P<0.01),表达明显增强,其在细胞内的分布状态也有明显改变。结论PTP1B、PTP-LAR在体外培养的大鼠RPE细胞中有明显表达,SOV可明显抑制其作用并调节α-SMA的表达和分布。