三氧化二砷对兔视网膜色素上皮细胞DNA损伤的研究

摘要

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对视网膜色素上皮(RPE)细胞的损伤作用。方法按照Singh的方法从色素兔眼分离RPE细胞并进行体外培养,培养的细胞用细胞角蛋白进行免疫组织化学鉴定。按照对培养细胞的干预方式不同分为阴性对照组(培养基中加入PBS)、阳性对照组(254nm紫外线照射10min)及实验组。实验组分别在培养基中加入终浓度为50.00、5.00、2.00、1.00、0.50、0.25μmol/L的As2O3作用1h。采用锥虫蓝染色法检测各组细胞的活性。采用彗星实验的方法测定细胞的损伤程度。结果90%以上的培养细胞对细胞角蛋白产生阳性的免疫反应。锥虫蓝染色表明各组细胞的形态和细胞活力均无明显差别。不同组中RPE细胞的尾部DNA含量和尾距的差异均有统计学意义(F=88.548,P=0.000;F=129.704,P=0.000)。与对照组比较,不同浓度的As2O3实验组RPE细胞的尾部DNA含量和尾距明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05),其中50μmol/L组最明显,而0.5μmol/L、0.25μmol/L组与对照组间差异则无统计学意义(P<0.05)。结论AsO能够诱导RPE细胞的DNA损伤,损伤程度与AsO的浓度有关。