小鼠角膜基质细胞分泌的转化生长因子β2及前列腺素E2对树突状细胞成熟过程的抑制作用

摘要

背景研究表明，位于角膜中央区的树突状细胞（DCs）完全处于未成熟状态，而位于角膜周边区的DCs则大多处于成熟状态。角膜内的DCs广泛参与多种角膜相关疾病以及角膜移植免疫排斥反应，研究角膜内DEs的成熟状态具有重要意义。目的探讨小鼠角膜基质细胞（CSCs）是否通过分泌转化生长因子β2（TGF—β2）以及前列腺素E：（PGE2）抑制DCs的成熟。方法获取DCs、T细胞以及CSCs培养上清液。通过酶联免疫吸附实验（ELISA）测定CSCs培养上清液以及新鲜RPMI1640培养基内PGE2和TGF—β2的质量浓度。在DCs成熟过程中，应用TGF—β2中和抗体以及PGE：受体阻滞剂AH6809，并按照处理方式的不同分为对照组、CSCs培养上清液组、AH6809组、TGF—β2中和抗体组、AH6809＋TGF—β2中和抗体组。采用流式细胞技术检测DCs细胞表型CDllc、CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达情况，通过葡聚糖内吞实验检测抗原吞噬功能，并通过混合淋巴细胞反应检测刺激T细胞增生的能力。结果ELISA检测结果显示，与新鲜RPMI1640培养基相比，CSCs培养上清液内含有较高质量浓度的TGF—β2和PGE2。与CSCs培养上清液组比较，TGF—β2中和抗体组DCsCD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达均升高，差异均有统计学意义（P〈0．05），葡聚糖的表达降低（P〈0．05），刺激指数（SI）增大（P〈0．05）；AH6809组CD86和MHC-Ⅱ的表达均升高，葡聚糖的表达降低，SI增大，差异均有统计学意义（P〈0．05）；TGF—β2中和抗体＋AH6809组DCsMHC-Ⅱ的表达和SI提高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较，TGF—β2中和抗体＋AH6809组DCsCD80、CD86的表达和SI均较低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论体外培养的小鼠CSCs可以通过分泌TGF—β2及PGE2抑制DCs成熟，且这两种细胞因子可发挥叠加效应。