增生性玻璃体视网膜病变眼玻璃体中差异蛋白质组的鉴定

摘要

背景增生性玻璃体视网膜病变（PVR）是导致视网膜脱离手术失败的最主要原因之一。蛋白质组学是研究人体组织中差异蛋白的重要方法。目的应用双向凝胶电泳（2-DE）联合质谱分析法对原发性视网膜脱离伴PVR患者进行差异蛋白质组分析，筛选出PVR眼特异的蛋白质表达。方法经玻璃体切割术收集PVRB级（轻度PVR），PVRC、D级（重度PVR）患者各8例8眼的玻璃体标本进行（2-DE）联合质谱检测分析，正常供体8眼作为对照。抽取的玻璃体标本再水化液重溶后，加至固相pH梯度胶条（18CIn，pH3—10）水化，等电聚焦，平衡后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，银染。对差异明显的蛋白质点（至少2倍以上的吸光度）进行胶内酶解，质谱鉴定。结果供体眼、轻度PVR眼和严重PVR眼经2-DE图谱分别检测到玻璃体标本中47、184和336个蛋白质点，PVR增加的蛋白质点的pH等电点以5～8居多，轻度PVR和重度PVR分别为104（56．5％）和230点（68．5％），在13个明显差异点中鉴定到7种蛋白质。其中，烯醇酶为供体眼所特有，甲状腺激素结合蛋白单体和视黄醇结合蛋白（RBP）单链为重度PVR玻璃体中特异表达的蛋白质，前列腺素D合成酶和RBP3前体在供体眼和PVR眼玻璃体均能检测到，且在轻度PVR眼中表达量较高，严重PVR眼下调。玻璃体中血清白蛋白和转铁蛋白随PVR严重程度的增加而明显上调。结论PVR发病过程中，原有的玻璃体蛋白质发生降解，部分血清中的蛋白质明显k调，表明PVR眼有血一视网膜屏障的破坏。