雌雄激素对去卵巢雌鼠泪腺中基质金属蛋白酶-2表达的影响

摘要

背景 干眼的发病机制比较复杂,性激素的改变被认为是其影响因素之一,性激素在许多组织中调节基质金属蛋白酶（MMPs）的合成,然而性激素在泪腺中MMP-2的表达作用却不十分清楚. 目的 观察雌激素、雄激素对去卵巢雌鼠泪腺中MMP-2表达的影响,探讨MMP-2在干眼中的作用机制.方法 采用随机数字表法将清洁级雌性性成熟Wistar大鼠64只随机分为正常对照组8只、伪手术组8只及实验组48只.伪手术组大鼠仅打开腹腔切除部分脂肪,实验组大鼠行双侧卵巢切除术（OVX）.OVX术后5个月采用随机数字表法将实验组随机分为模型对照组、药物赋形剂组、全身雌二醇治疗组、雌二醇点眼组、全身睾丸酮治疗组和睾丸酮点眼组,每组8只大鼠,分别全身及局部给予玉米油、苯甲酸雌二醇、丙酸睾丸酮药物.给药6周后摘取大鼠泪腺,应用逆转录-PCR（RT-PCR）法检测各组大鼠泪腺中MMP-2 mRNA的表达,采用Westernblot法检测大鼠泪腺中MMP-2蛋白含量（MMP-2/GAPDH）的变化. 结果 RT-PCR检测表明,全身雌二醇治疗组大鼠泪腺中的MMP-2 mRNA表达量最强,而全身睾丸酮治疗组泪腺中的MMP-2 mRNA表达量最弱.各组间MMP-2 mRNA表达量（MMP-2 mRNA/β-actin mRNA）的差异有统计学意义（F=18.60,P＜0.01）,其中模型对照组大鼠泪腺中MMP-2 mRNA表达水平明显高于正常对照组（0.66±0.10 vs.0.47±0.10）,差异有统计学意义（q=3.01,P＜0.05）；全身雌二醇治疗组大鼠泪腺中MMP-2 mRNA表达值为0.83±0.10,明显高于模型对照组,差异有统计学意义（q=2.79,P＜0.05）,而全身睾丸酮治疗组大鼠泪腺中MMP-2 mRNA表达值为0.12±0.04,明显低于模型对照组,差异有统计学意义（q=11.41,P＜0.0i）.Western blot法检测结果显示,全身雌二醇治疗组大鼠泪腺中MMP-2蛋白表达最强,而全身睾丸酮组泪腺中的MMP-2蛋白表达量最弱.各组间大鼠泪腺中MMP-2蛋白表达差异有统计学意义（F=7.28,P＜0.01）.模型对照组大鼠泪腺中MMP-2蛋白表达量为0.55±0.13,明显高于正常对照组的0.38±0.08,差异有统计学意义（q=2.39,P＜0.05）；全身雌二醇治疗组大鼠泪腺中MMP-2蛋白表达量为0.69±0.12,明显高于模型对照组,差异有统计学意义（q=1.85,P＜0.05）,而全身睾丸酮治疗组大鼠泪腺中MMP-2蛋白表达量为0.27±0.07,明显低于模型对照组,差异有统计学意义（q=4.32,P＜0.01）.结论 雌激素可以上调去卵巢雌鼠泪腺中MMP-2的表达水平,而雄激素下调去卵巢雌鼠泪腺中MMP-2的水平,进而影响泪腺的分泌功能.