胰岛素样生长因子-1及其受体在晶状体上皮细胞迁移中的作用

摘要

背景 白内障囊外摘出术后发生的后囊膜混浊（PCO）与残留晶状体上皮细胞（LECs）的增生和迁徙有关,曾有研究认为,糖尿病患者后发性白内障的发生率高于正常人,而胰岛素样生长因子-1（IGF-1）是否可促进LECs的迁徙尚不清楚. 目的 探讨IGF-1/IGF-1受体（IGF-1R）系统对LECs迁移能力的影响,为临床上防治PCO提供理论依据. 方法 将人永生化LECs系（HLEC-B3）细胞在DMEM中进行常规传代培养,第2代细胞采用荧光免疫组织化学法（兔抗人α-晶状体蛋白抗体）鉴定细胞.分别在培养基中加入质量浓度为0、30、90 μg/L的IGF-1培养48 h.将0、30、90 μg/L IGF-1中培养的细胞分别进行Transwell迁移小室实验,计数任意5个视野中结晶紫染色细胞,评估各组细胞的迁移能力.将细胞分别在0、1.5、30、60、90 μg/LIGF-1中培养,采用Western bolt法检测IGF-1R,包括IGF-1Rα和IGF-1Rβ亚基在各组细胞中的表达变化.结果 HLEC-B3细胞贴壁后48 h达对数生长期,培养的第2代HLEC-B3细胞对α-晶状体蛋白呈阳性反应,细胞膜呈红色荧光.各组细胞在Transwell迁移小室培养12h后,0 μg/L IGF-1组仅可见0（0,1）个染色的迁移细胞,30 μg/L IGF-1组和90 μg/L IGF-1组分别可见10（10,11）个和29（27,31）个染色的迁移细胞,30 μg/LIGF-1组和90 μg/L IGF-1组的迁移细胞数明显多于0μg/L IGF-1组,差异均有统计学意义（均P=0.008）,90 μg/L IGF-1组明显多于30 μg/L IGF-1组,差异均有统计学意义（P=0.009）.Western blot法检测发现,5个培养组细胞中IGF-1 Rα和IGF-1Rβ的表达量（IGF-1R/β-actin）差异均有统计学意义（F=63.700、130.530,均P=0.000）,当IGF-1质量浓度＞30 μg/L时,随着IGF-1质量浓度的增加,IGF-1Rα和IGF-1Rβ的表达量均逐渐升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 IGF-1能够上调HLEC-B3细胞膜上IGF-1R蛋白的表达,这种作用呈剂量依赖性;IGF-1能够增强体外培养的HLEC-B3细胞的迁移能力,提示PCO的发生可能与IGF-1/IGF-1R系统的激活有关.