反义RNA体外抑制丙型肝炎病毒基因表达的研究

摘要

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)基因调控方式及反义RNA对HCV基因表达的体外抑制作用.方法采用业已建立的HCV基因调控细胞模型,以重组质粒共转染策略,将反义RNA重组质粒与HCV 5′非翻译区(5′UTR)调控的报道基因--虫荧光素酶(luc)重组质粒共同转染人肝癌细胞系(HepG2),并以不表达反义RNA的原核重组质粒和不含有HCV 5′UTR的luc重组质粒做为对照.转染细胞经短期培养后制备细胞提取液,荧光检测法检测luc基因的表达.结果针对HCV 5′UTR的反义RNA可以在体外有效抑制由HCV 5′UTR调控的luc基因的表达,并具有剂量依赖效应.对照重组质粒转染实验证明,上述抑制作用呈序列特异性.结论HCV 5′UTR具有调控下游目的基因表达的重要功能,反义RNA可以在体外有效抑制由HCV 5′UTR介导的病毒基因的表达.