MiR-34a在高糖刺激下H9c2心肌细胞凋亡过程中的调控作用分析

摘要

目的 研究在高糖刺激下H9c2心肌细胞凋亡及凋亡过程中miR-34a(微小核糖核酸-34a的调控作用。方法 将H9c2心肌细胞按葡萄糖浓度不同分为两组(共12孔),使用高浓度葡萄糖(30mmol/L)刺激的观察组(6孔)和低浓度葡萄糖(5 mmol/L)培养的对照组(6孔),利用TUNEL法和流式细胞仪检测H9c2心肌细胞的凋亡情况,miR-34a等相关基因表达采用荧光实时定量PCR测定,通过Western Blot检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达。结果使用TUNEL法检测,染色计数后计算心肌细胞凋亡率,观察组心肌细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);使用流式细胞仪检测,观察组心肌细胞凋亡率,明显高于对照组[(9.97±0.32)%vs.(5.94±0.03)%,(P<0.05)];观察组H9c2心肌细胞miR-34a的表达量明显高于对照组,[(2.49±0.41)vs.(0.94±0.06),P<0.05];观察组Bcl-2 mRNA的表达低于对照组[(0.071±0.003)vs.(0.401±0.003),P<0.05];观察组Caspase-3 mRNA的表达高于对照组[(0.602±0.015)vs.(0.326±0.005),P<0.05]。结论 高糖刺激可促使H9c2心肌细胞凋亡,整个过程与miR-34a的高表达密切相关,可在临床为糖尿病心肌病的预防与治疗上提供新的思路。