模拟失重对HaCaT细胞增殖及细胞骨架的影响

摘要

目的研究模拟微重力环境对人永生化角质形成细胞（HaCaT）生长增殖及细胞骨架的影响。方法应用RCCS建立模拟微重力细胞培养系统,将HaCaT细胞随机（随机数字法）分为模拟微重力组（SMG）和正常重力对照组（NG）,经32 h、36 h和42 h培养后收集两组细胞,应用流式细胞仪技术检测细胞生长周期;ELISA检测细胞上清液hb-EGF浓度;激光共聚焦显微镜和荧光素FITC标记技术观察经42 h培养的两组HaCaT细胞骨架形态变化。采用SPSS 23.0统计学软件进行统计学分析,以P＜0.05为差异有统计学意义。结果流式细胞仪检测结果显示,与NG组比较,SMG组HaCaT细胞经32h、36h和42h培养,三个时相点的G1和G2/M期细胞数显著增加,S期细胞数显著减少（P＜0.05）。SMG组HaCaT细胞随培养时间延长,G1期细胞数呈减少趋势。ELISA结果显示,SMG组HaCaT细胞经32 h和36 h后hb-EGF浓度较NG组明显下降（P＜0.01）。激光共聚焦显微镜观察荧光素FITC标记的HaCaT细胞,发现模拟微重力培养42h后,HaCaT细胞的荧光强度减弱,微丝排列紊乱,结构破坏明显,部分模糊不可见,细胞间伪足较少且不规则。结论 RCCS模拟微重力环境抑制HaCaT细胞周期转化和增殖,影响hb-EGF自分泌机能,并导致细胞骨架结构发生变化。