胰岛素对新生大鼠缺氧/复氧诱导心肌细胞凋亡的影响

摘要

目的探讨胰岛素对缺氧/复氧所诱导心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法通过给原代培养乳鼠心室肌细胞行缺氧2h/复氧4h,建立缺氧/复氧（anoxia/reoxygenation）心肌细胞损伤模型。于复氧期开始随机给予0.9%生理盐水（VC组）、胰岛素（INS组）、LY294002（LY组）、胰岛素+LY294002（INS+LY组）干预。于复氧4h后,利用2,4二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶（LDH）活性,硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛（MDA）含量,原位末端标记法（TUNEL）和DNA梯带法（DNALadder）标测细胞凋亡,免疫印迹法（Westernblotting）检测磷酸化Akt表达,并比较各组间差异。结果与VC组相比,INS组中LDH活性、MDA含量、凋亡指数（AI）显著降低（P＜0.01）,磷酸化Akt表达明显增加（P＜0.01）;但上述指标变化可被LY294002（PI3K抑制剂）所抑制。结论在复氧早期给予胰岛素干预可显著地减少缺氧/复氧所诱导的心肌细胞凋亡,其保护机制与PI3K/Akt所介导的抗细胞凋亡作用有关。