羟基喜树碱诱导胃癌细胞凋亡的作用机制初步研究

摘要

目的研究羟基喜树碱(HCPT)诱导胃癌细胞的凋亡作用及对凋亡相关基因p53、c-myc、bcl-2、bcl-xl和bcl-xs表达的影响,探讨其诱导胃癌细胞凋亡的作用机制.方法应用TUNEL染色、流式细胞仪、免疫组化和RT-PCR技术等研究HCPT对胃癌细胞SGC-7901和MKN-45的诱导凋亡作用和对凋亡相关基因表达的影响.结果HCPT作用于细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化:细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片段化,凋亡小体形成等.流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的"凋亡峰”.流式细胞仪计数显示,10μg/ml的HCPT诱导胃癌细胞SGC-7901和MKN-45的凋亡率为21.88%和12.34%.TUNEL染色法显示,细胞凋亡指数在1.86%～9.54%之间.免疫组化和RT-PCR结果显示:HCPT能够明显下调SGC-7901细胞的p53和bcl-2基因的蛋白和mRNA表达;对SGC-7901细胞的c-myc、bcl-xl和bcl-xs基因的蛋白表达无影响.HCPT作用后MKN-45细胞的p53蛋白和mRNA的表达增加;对MKN-45细胞的bcl-2、c-myc、bcl-xl和bcl-xs基因的表达无影响.结论 HCPT能够诱导胃癌细胞凋亡,可能是通过调控胃癌细胞的p53和bcl-2的表达而诱导胃癌细胞凋亡.