晚期糖基化终产物受体特异性小干扰RNA抑制肝星状细胞表达初探

摘要

目的探讨晚期糖基化终产物受体（RAGE）特异性小干扰RNA（siRNA）在肝纤维化中对纤维化标志物[层粘连蛋白、透明质酸、血清Ⅲ型前胶原（PⅢNP）]生成的影响。方法构建RAGE特异性siRNA表达载体pAKD-GR126,分离培养原代大鼠肝星状细胞（HSC）,将重组载体转染入原代大鼠HSC,以空白组和转染非特异性siRNA表达载体pAKD-NC组为对照,分别用PCR法和Western免疫印迹法检测各组原代HSC RAGE、层粘连蛋白、透明质酸、PⅢNP mRNA及蛋白的表达。正态分布及方差齐性资料采用方差分析（LSD）及SNK法两两比较,非正态分布及方差不齐资料采用非参数秩和检验。结果转染特异性siRNA表达载体pAKD-GR126的原代HSC RAGE mRNA和蛋白的表达率分别为空白组和pAKD-NC组的（42.32±6.16）%、（43.24±7.50）%和（51.06±13.79）%、（47.94±5.36）%（F=7.791,36.513;P均＜0.05）;层粘连蛋白mRNA和蛋白的表达率分别为空白组和pAKD-NC组的（41.07±3.13）%、（40.59±5.87）%和（53.89±2.25）%、（52.46±4.68）%（F=225.111,88.039;P均＜0.05）;透明质酸mRNA和蛋白的表达率分别为空白组和pAKD-NC组的（45.69±0.87）%、（46.08±2.36）%和（54.20±0.56）%、（52.30±3.42）%（F=178.317,180.646;P均＜0.05）;PⅢNP mRNA和蛋白的表达率分别为空白组和pAKD-NC组的（56.10±4.18）%、（55.15±2.39）%和（54.40±2.79）%、（53.58±6.18）%（F=141.633,49.670;P均＜0.05）。结论 RAGE特异性siRNA可抑制原代大鼠HSC RAGE基因的表达,并能显著降低纤维化标志物（层粘连蛋白、透明质酸、PⅢNP）基因及蛋白的表达。