RNA干扰对系统性硬化病皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

摘要

目的研究RNA干扰对系统性硬化病（SS）皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子（CTGF）mRNA和蛋白表达水平的影响。方法设计4个针对CTGF的特异性小干扰RNA（siRNA）及一个非特异性siRNA。体外转录获得siRNA,将siRNA用6-羧基荧光素（FAM）标记后瞬时转染至原代培养的SS患者皮肤成纤维细胞;转染48h后,以RT-PCR及蛋白印迹法分别检测CTGFmRNA及蛋白量的变化。结果转染了4个特异性siRNA的成纤维细胞中CTGFmRNA水平均有不同程度下调（P＜0.001）,抑制效果由强至弱为,siRNA742＞siRNA828＞siRNA578＞siRNA948。蛋白印迹则显示有3个siRNA能使CTGF蛋白表达水平不同程度下调（P＜0.001）,其中siRNA742的抑制效应最强。结论RNA干扰能显著抑制SS成纤维细胞CTGF的表达。