Wnt10b诱导再生毛囊的表达特性研究

摘要

目的研究Wnt10b诱导再生毛囊的表达特性及诱导作用机制。方法 HEK-293细胞内扩增并用氯化铯梯度离心纯化Wnt10b过表达腺病毒及对照腺病毒, 皮内注射至C57BL/6J小鼠背部皮肤, 在处理后2.5、5、7、9、14、28 d时取材, HE染色及免疫组化染色观察毛囊结构特征、信号通路表达特征及增殖特性。结果 HE染色发现, AdWnt10b处理组从第5天开始出现新生毛囊结构, 正常生长, 第28天左右进入退化期。免疫组化染色发现, AdWnt10b处理组从处理后5 d开始新生毛囊具有AE15表达, 随着毛囊生长而增加, 至处理后28 d开始减少。在AdWnt10b处理后5 d, 观察到β连环素的核表达, Lef1特异性表达于毛芽和毛母质部位, 且全为核表达。在AdWnt10b处理后28 d, Lef1表达减弱。AdWnt10b处理后2.5 d即可见Ki67表达于表皮和毛囊外根鞘。处理后2.5、7、9、14 d均在隆突区见到Ki67的表达;从处理后7 d开始, Ki67表达于毛母质细胞。结论 Wnt10b诱导的再生毛囊具有正常的毛囊结构, Wnt10b激活了经典Wnt信号通路, 其作用的靶细胞是毛囊干细胞及其子代细胞。