大肠杆菌素通道结构域与变异链球菌感受刺激多肽原核载体的构建和表达

摘要

目的:表达并纯化大肠杆菌素Ia通道结构域(Coliein h channel domain)与变异链球菌感受刺激多肽(CSP)的融合蛋白.方法:将编码大肠杆菌素la通道结构域的基因与编码变异链球菌感受刺激多肽CSP的基因导入带有麦芽糖结合蛋白(MBP)基因的pMA-c2x质粒中,构建pMAL-c2x-Coliein Ia channel domain-CSP融合表达载体,将重组质粒转化大肠埃希菌BL21后,IPTG诱导融合蛋白表达,裂解后得到目的蛋白.结果:通过双酶切、电泳分析、测序,证明成功构建了pMAL-c2x-Colicin Ia channel domain-CSP融合表达载体,目的蛋白产物经SDS-PAGE分析,与预期一致.结论:成功构建了pMAL-c2x-Coliein Ia channel domain-CSP,表达并纯化目的蛋白,为进一步研究Colicin Ia channel domain-CSP的功能奠定了基础.