microRNA-574-3p抑制结肠癌细胞增殖的机制研究

摘要

目的 观察微小RNA-574-3p(microRNA-574-3p,miR-574-3p)对结肠癌细胞增殖的影响,并探讨其潜在的作用机制.方法 采用结肠癌细胞HCT116作为实验对象,细胞转染miR-574-3p mimic和阴性对照分别作为miR-574-3p mimic组和阴性对照组,同时以正常HCT116细胞作为空白对照组.RT-qPCR检测细胞miR-574-3p表达;CCK-8法检测细胞增殖活力;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot法检测CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A及P53蛋白表达变化.结果 与阴性对照组相比,miR-574-3p mimic组miR-574-3p表达明显上调(P<0.01),且在36～72 h细胞活力明显降低(P<0.01).与阴性对照组相比,miR-574-3p mimic组细胞克隆形成率显著降低(P<0.01),同时S期细胞比例显著增加(P<0.01).相较于阴性对照组,miR-574-3p mimic组CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A蛋白表达显著下调(P<0.01),P53蛋白表达明显上调(P<0.01).阴性对照组与空白对照组上述各指标均无明显差异.结论 miR-574-3p可抑制结肠癌HCT116细胞增殖,这可能与下调CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A及上调P53蛋白表达,最终诱导细胞S期阻滞有关.