分化抑制因子1在乙型肝炎病毒复制、肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制研究

摘要

目的探讨分化抑制因子1(inhibitor of differentiation 1,Id1)在乙型肝炎病毒复制、肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制。方法使用RNA干扰技术将HepG2.2.15肝癌细胞株的Id1基因沉默,作为siRNA-Id1组;设计无关序列作为siRNA-Control组;使用Pifithrin-α抑制siRNA-Id1细胞中p53的表达,作为siRNA-Id1+Pifithrin-α组;将HepG2.2.15肝癌细胞作为Control组。依次使用qRT-PCR、Western blot、ELISA、MTT、流式细胞术检测乙型肝炎病毒的复制、细胞的增殖和凋亡。结果siRNA-Id1组细胞中Id1 mRNA和蛋白的表达量低于siRNA-Control组(P<0.05)。与siRNA-Control组相比较,siRNA-Id1组细胞中HBx mRNA和蛋白的表达量降低(P<0.05),上清液中HBs Ag和HBeAg的含量降低(P<0.05),细胞增殖缓慢(P<0.05),早期细胞凋亡比例和晚期细胞凋亡比例升高(P<0.05),细胞中Bax和Cleaved caspase-3蛋白的表达量升高(P<0.05),而Bc L-2蛋白的表达量降低(P<0.05)。Pifithrin-α可不同程度的抑制Id1基因沉默后的上述生物学效应(P<0.05)。结论RNA干扰Id1可以降低乙型肝炎病毒的复制,抑制肝癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与p53的过表达有关。