胰高血糖素肽-1受体激动药对心肌成纤维细胞增殖的影响及其机制研究

摘要

目的研究胰高血糖素肽-1受体激动药(Exendin-4)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维化的作用及其机制。方法用Ⅱ型胶原酶消化心脏组织并结合差速贴壁法分离纯化的心肌成纤维细胞(CFb);将CFb分为7组:空白组(无任何处理),模型组(AngⅡ100 nmol·L^-1),阳性对照组(洛沙坦10μmol·L^-1),抑制剂组(U012630μmol·L^-1)和低、中、高3个剂量实验组(Exendin-41,5,10 nmol·L^-1)。四唑盐法检测细胞增殖率;以免疫印迹试验测定细胞CollagenⅠ、磷酸化ERK1/2和磷酸化AKT蛋白的相对表达水平(灰度值)。结果空白组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的细胞增殖率分别为(7.31±2.18)%,(30.31±3.88)%,(28.93±2.18)%,(20.17±2.19)%和(17.85±2.36)%;模型组与空白组相比、或者低、中、高3个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。空白组、模型组、高剂量实验组和阳性对照组的Collagen I相对表达量分别为0.96±0.08,1.30±0.07,1.01±0.07和0.99±0.05;这4组磷酸化ERK的相对表达量分别为0.52±0.07,1.15±0.26,0.69±0.28和0.64±0.06;这4组的磷酸化AKT的相对表达量分别是0.68±0.18,1.03±0.23,0.70±0.19和0.69±0.18。模型组与空白组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);高剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论Exendin-4可预防Ang II诱导的心肌纤维化,其作用机制可能通过抑制CFb的增殖、下调ERK和AKT蛋白磷酸化水平,从而减少Collagen I合成来发挥作用的。