miR-182对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响研究

摘要

目的探讨微小核糖核酸-182(miR-182)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)/三磷酸磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的影响。方法人乳腺癌MCF-7细胞分为miR-182组、anti-miR-182组、miR-NC组和对照组,分别转染miR-182拟似物、miR-182阻遏物、miR-182阴性对照物和空白试剂,每组设置6个复孔。用噻唑蓝法检测MCF-7细胞增殖情况,用流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应测定MCF-7细胞miR-182和PTEN mRNA的表达,用蛋白质印迹法测定MCF-7细胞PTEN和p-AKT蛋白表达。结果培养24 h时,对照组、miR-182组、anti-miR-182组和miR-NC组的OD值分别0.58±0.21,0.73±0.19,0.41±0.16和0.56±0.17;培养48 h时,上述4组OD值分别为0.87±0.19,1.32±0.31,0.49±0.14和0.83±0.18;培养72 h时,上述4组OD值分别为1.33±0.38,2.08±0.41,0.58±0.19和1.28±0.31,anti-miR-182组的上述指标与其他组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、miR-NC组、anti-miR-182组和miR-182组的细胞凋亡率分别为(3.59±0.54)%,(3.64±0.73)%,(8.23±0.82)%和(2.12±0.47)%,miR-182组和arti-miR-182组与其他组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。anti-miR-182组、对照组、miR-NC组、miR-182组的miR-182 mRNA相对表达量分别为0.24±0.11,0.62±0.16,0.65±0.13,0.87±0.09,PTEN mRNA相对表达量分别为0.72±0.16,0.35±0.08,0.34±0.09,0.12±0.06,PTEN蛋白相对表达量分别为0.73±0.11,0.55±0.09,0.52±0.09,0.35±0.06,p-AKT蛋白相对表达量分别为0.28±0.09,0.48±0.10,0.49±0.08,0.69±0.06,miR-182组和anti-miR-182组与其他组别比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-182可能通过降低抑癌基因PTEN表达,激活PI3P/AKT信号通路促进乳腺癌细胞增殖和抑制其凋亡,在乳腺癌发生发展中发挥重要作用,提示抑制miR-182进而靶向PTEN/PI3K/AKT信号通路可能是乳腺癌治疗的有效途径。