香叶木素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

摘要

目的探索香叶木素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)暴露于30 mmol·L^(-1)高葡萄糖(HG)中48 h,建立高糖诱导的血管内皮细胞损伤模型。将模型细胞分为模型组(30 mmol·L^(-1) HG干预48 h)和低、中、高3个浓度香叶木素处理组(30 mmol·L^(-1) HG干预48 h+5,10,20 mmol·L^(-1)香叶木素处理24 h)。处理结束后噻唑蓝法检测各细胞活力;相关试剂盒检测各组中一氧化氮(NO),乳酸脱氢酶(LDH)和活性氧(ROS)水平;流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平;免疫荧光观察自噬标志物微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)和细胞色素c氧化酶亚基IV(COXIV)的共定位比例;蛋白质印迹法测量Yes相关蛋白(YAP)、戴帽蛋白肌Z系Β(CAPZB)和B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达水平。结果对照组、模型组和低、中、高3个浓度实验组的细胞活性分别为(100.00±2.43)%,(25.12±1.19)%,(28.34±1.32)%,(45.45±2.68)%,(66.93±2.51)%,(89.46±2.89)%;这5组细胞凋亡率分别为(5.23±0.38)%,(19.41±1.17)%,(13.38±0.84)%,(10.12±0.46)%,(6.15±0.25)%;这5组免疫荧光共定位比例分别为(100.45±2.39)%,(25.31±1.22)%,(24.48±1.17)%,(50.56±1.88)%,(76.28±1.91)%;这5组ROS水平的分别为(100.36±2.59)%,(452.62±14.23)%,(386.27±16.31)%,(267.33±11.37)%,(220.42±12.25)%;这5组YAP蛋白表达水平分别为(100.21±2.17)%,(25.45±1.28)%,(43.36±1.44)%,(60.39±1.53)%,(71.33±3.06)%;这5组CAPZB蛋白表达水平分别为(100.48±2.51)%,(24.13±1.07)%,(35.05±1.38)%,(47.36±2.49)%,(71.42±3.75)%;这5组Bax蛋白表达水平分别为(100.16±1.08)%,(368.73±3.69)%,(271.54±2.47)%,(184.58±1.86)%,(122.47±7.82)%。上述指标,模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);不同浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论香叶木素可通过激活YAP信号通路减轻HG诱导的HUVEC损伤。