人肝癌细胞株HepG2中原钙粘附蛋白10基因异常甲基化及其与HBx蛋白的关系

摘要

目的 研究原钙粘附蛋白10(PCDH10)启动子在人肝癌细胞株HepG2中的甲基化状态及与HBx调控的相关性.方法 用逆转录PCR( RT-PCR)和甲基化特异性聚合酶链反应(MSP),检测去甲基化药物5-氮-2′-脱氧胞苷(Aza)联合组蛋白乙酰化酶抑制剂TSA( trichostatin A)处理前后,HepG2细胞中PCDH10基因的表达及启动子甲基化水平；用亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)定位检测发生甲基化的CG位点.用MSP检测表达HBx基因的重组腺病毒感染HepG2细胞后PCDH10基因的表达及甲基化水平.结果 PCDHI0基因在HepG2细胞株中表达沉默,其启动子发生明显甲基化,Aza可以部分去除PCDH10甲基化从而上调其mRNA表达水平.但HBx蛋白表达不影响HepG2细胞中PCDH10的甲基化程度.结论 PCDH10启动子异常甲基化使HepG2细胞内转录沉默,但其甲基化状态与HBx蛋白表达无关.