两种量子点标记用于抗核抗体检测的对比研究与评价

摘要

目的 对比研究两种不同粒径量子点(QDs)标记抗体在抗核抗体(ANA)检测中的成像效果,评价其在临床样本检测中的应用价值.方法 Hep-2细胞为抗原片,分别以QD655和QD605标记第二抗体(二抗),用间接免疫荧光分析(IIFA)检测114例自身免疫病患者和30例健康对照者血清ANA,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的二抗为对照.单特异性ANA用免疫印迹法(IBT)确认.比较和评价各法应用效果.结果 经对114例患者血清研究发现,两种QD标记二抗均可见与FITC标记二抗检测ANA结果相同或类似的荧光模式,但ANA滴度略显不同,对核颗粒型与胞浆颗粒型ANA测定灵敏度以QD655为最高,QD605次之,FITC标记二抗相对较弱.而对核均质型、核仁型与核着丝点型ANA测定灵敏度高低依次为FITC、QD655和QD605标记二抗.相关分析结果显示,两种QD与FITC标记物检测ANA滴度结果均呈高度正相关,r值分别为0.834、0.832(P均＜0.01).两种QD标记二抗对核颗粒型、胞浆颗粒型荧光模式与FITC标记二抗检测结果阳性符合率均为100％；而核均质型与核仁型检测,阳性结果符合率为80.6％ ～ 84.4％.30例用FITC标记二抗检测ANA阴性血清中,两种QD标记二抗检测均见1例ANA阳性.两种QD与FITC标记物检测ANA总符合率均超过90.0％,有高度的一致性(Kappa值均＞0.75).结论 QD655和QD605标记二抗用于ANA检测总体结果稳定、灵敏、可行；QDs粒径越大其标记二抗测定ANA灵敏度越高,但对某些低滴度免疫荧光核型(包括核均质型、核仁型与核着丝点型)ANA有漏检可能.