心脏钠通道无义突变的分子拯救部分恢复钠通道的表达和功能

摘要

目的研究探讨真核释放因子eRF3a的RNA干扰如何影响心脏钠通道无义突变的表达和功能。方法构建心脏钠通道无义突变和干扰eRF3a RNA的真核表达载体,独立或共同转染HEK293细胞,全细胞膜片钳记录钠通道的表达电流和动力学,同时应用蛋白印迹和免疫荧光证明钠通道的表达和定位。结果独立转染W822X无义突变的HEK293细胞没有检测到全长钠通道蛋白,表达的钠电流水平很低,仅相当野生型钠电流3%。共同转染HEK293细胞可以检测到全长钠通道蛋白,表达的钠电流水平明显增加,相当于野生型钠电流30%。免疫荧光也显示,独立转染W822X无义突变的HEK293细胞没有出现荧光细胞,而共同转染的HEK293细胞出现较多的荧光细胞。结论真核释放因子eRF3a的RNA干扰促进心脏钠通道无义突变的翻译,部分恢复钠通道全长表达和功能。