抗人P185^(erbB2)单抗C25的生物活性及其可变区基因的克隆

摘要

了解抗人P185erbB2单抗C25的生物学活性,并克隆其可变区基因 ,为研制抗人P185erbB2的人源化抗体奠定基础。方法 :以细胞ELISA、免疫组化等方法分析C25单抗的抗原结合特性 ,用MTT法检测其对乳腺癌细胞SKBR3、及卵巢癌细胞SKOV3 增殖的抑制作用及对化疗药的增敏作用。经RT PCR扩增C25单抗的轻、重链可变区基因 ,克隆后进行核苷酸序列分析。结果 :C25单抗能特异结合人P185erbB2胞外区抗原 ,可显著抑制SKBR3、SKOV3 细胞增殖 ,与顺铂具协同作用。抗体的轻链可变区基因327bp,属于小鼠κ轻链第Ⅲ亚群 ;重链可变区基因366bp属于小鼠IgG1第Ⅲ (A)亚群。结论 :C25单抗可显著抑制人P185erbB2过表达肿瘤细胞的增殖并与顺铂具协同作用 。