抗人红细胞H抗原非凝集型单抗可变区基因的克隆与分析

摘要

目的：克隆抗人红细胞H抗原非凝集型杂交瘤细胞株2E8中的单克隆抗体重链、轻链可变区基因. 方法：从单克隆抗体细胞株2E8中提取总RNA,采用RT-PCR与5'RACE两种不同的方法克隆抗体的可变区基因,并对其进行了初步的分析. 结果：RT-PCR与5'RACE法克隆的重链可变区基因分别为351bp和349bp,属于鼠抗体可变区重链基因家族Ⅰ(B)亚群,轻链可变区基因分别为339bp和336bp,属于鼠抗体可变区轻链基因家族Ⅰ亚群.RT-PCR与5'RACE法克隆的可变区基因所推导的氨基酸残基的比对,发现两者之间在骨架区存在若干氨基酸残基的差异,重链可变区与轻链可变区分别有6个和4个氨基酸残基的差异。