表达CD40L卵巢癌细胞的生物学特性和抗肿瘤特性研究

摘要

背景与目的:CD40与CD40配体(CD40L)间的结合反应可以启动体液和细胞免疫应答,在宿主抗肿瘤免疫反应中起着重要作用。然而,一些肿瘤细胞如表达CD40L的卵巢癌细胞与宿主相互作用的分子机制仍不十分清楚。本文旨在探讨转染CD40LcDNA的小鼠卵巢癌细胞株OVHM(CD40L/OVHM)的生物学特性及抗肿瘤效应。方法:用脂质体转染法将CD40LcDNA转入OVHM细胞,流式细胞技术检测CD40L/OVHM和OVHM细胞中CD40、CD40L、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达水平。MTT法检测CD40L/OVHM和OVHM细胞的增殖反应。将OVHM或CD40L/OVHM细胞皮下接种6～8周龄的C57BL/6N×C3H/He杂交一代(B6C3F1)小鼠和BALB/c裸鼠,观察肿瘤的生长情况。ELISA法测定皮下接种OVHM或CD40L/OVHM细胞小鼠脾细胞和经放射线照射的OVHM细胞培养上清中IFN-γ释放量。结果:与亲本OVHM细胞相比,转染CD40LcDNA的CD40L/OVHM细胞CD40L表达明显升高(P<0.05),CD40、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表达无明显变化,共刺激分子CD80、CD86的表达明显增强(P<0.05);转染和未转染CD40L的OVHM细胞增殖无显著性差异。接种CD40L/OVHM细胞的小鼠,肿瘤的生长速度与接种OVHM小鼠相比明显减慢,且无腹腔转移结节,大部分小鼠无肿瘤细胞生长。再次于接种CD40L/OVHM细胞的小鼠对侧皮下接种OVHM细胞(2×105),则无肿瘤生长。将接种CD40L/OVHM的小鼠脾细胞和经放射线照射的OVHM细胞体外混合培养,分泌IFN-γ的水平[(1802±187.7)pg/ml]明显高于接种OVHM细胞和未接种肿瘤细胞的小鼠脾细胞所分泌的IFN-γ量[(20.3±7.9)pg/ml、(100.3±19.9)pg/ml]。结论:转染CD40L基因可提高OVHM细胞的抗原性,引起较强的特异性细胞毒T淋巴细胞抗肿瘤免疫。