含CpG寡核苷酸在人神经母细胞瘤裸鼠移植瘤模型中的抗肿瘤效应

摘要

背景与目的:含有非甲基化CpG二核苷酸的寡脱氧核苷酸(CpG oligonucleotides,CpGODN)序列可以模拟细菌DNA特征,作为"异己信号"刺激机体免疫系统,发挥抗肿瘤作用。本研究探讨在人神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)裸鼠移植瘤模型中,CpGODN是否可以通过调节非特异性免疫来介导抗肿瘤效应。方法:体外WST-1实验明确CpGODN对神经母细胞瘤细胞株SK-N-MC的生长影响,建立NB荷瘤动物模型,当肿瘤生长到皮下可触及时,随机分组后给予不同注射处理(生理盐水、non-CpGODN、CpGODN)、观察各组小鼠肿瘤生长情况,病理组织学方法检测各组肿瘤组织的异同,免疫荧光组化法检测自然杀伤细胞(natural kill cell,NK)和巨噬细胞的浸润。结果:体外实验证明CpG ODN对SK-N-MC细胞无明显的直接细胞毒性及生长抑制作用。CpGODN处理组与non-CpG ODN、生理盐水组相比,肿瘤细胞生长明显受到抑制[(0.14±0.03)cm3vs.(2.97±0.40)cm3、(3.80±1.12)cm3(P<0.01)]。HE染色显示与肿瘤细胞生长活跃的对照组相比,CpG ODN处理组肿瘤组织中有较多的炎性细胞浸润及大片坏死灶。免疫荧光染色发现CpG ODN处理组与生理盐水组、non-CpG ODN组相比较瘤体内有明显的NK、巨噬细胞浸润。结论:具有免疫刺激作用的CpG ODN可能通过调节NK、巨噬细胞的活性来抑制NB生长,发挥抗肿瘤作用。