α-平滑肌肌动融合蛋白抑制成纤维细胞收缩的实验研究

摘要

目的 观察α 平滑肌肌动融合蛋白 （α SMA FP）对成纤维细胞收缩功能的影响。方法建立Wistar大鼠皮肤成纤维细胞三维立体凝胶培养模型。成纤维细胞在胶原凝胶中培养 5d后 ,实验组分别用 5、10、5 0、10 0、2 5 0mg/L的α SMA FP进行处理 ,根据α SMA FP剂量不同分为E1、E2 、E3 、E4和E5组。对照组分为空白对照 （C1）组和 2 5 0mg/Lα 骨骼肌肌动融合蛋白 （α SKA FP）处理（C2 ）组。测量处理前后凝胶的直径 ,计算收缩率。检测E5组冲洗掉α SMA FP后 （wash组 ）凝胶收缩率的变化情况。对传代后的成纤维细胞用α SMA FP或α SKA FP处理后进行α SMA免疫荧光染色。 结果 C1和C2 组凝胶收缩率为 （5 8.6± 3.1） %和 （5 6 .2± 4 .9） % ,二者差异无显著性意义 （P＞0.0 5）。E1～E5组的收缩率分别为 （4 5 .5 6± 4 .1） %、（4 2 .3± 4 .2 ） %、（4 1.8± 3.6 ） %、（37.6±5 8） %、（2 6 .4± 4 .7） % ,wash组收缩率为 （4 8.2± 4 .9） %。E1～E5组与C1、C2 组比较 ,差异均有显著性意义 （P ＜0.0 5 ）,与wash组比较 ,差异有非常显著性意义 （P ＜0.0 1）。α SMA FP着色于成纤维细胞纤维丝上 ,转染α SMA时着色不明显 ,而用α SMA FP处理后 ,α SMA着色明显。 结论 α SMA FP可特异性抑制成纤维细胞收缩 ,且有剂量依赖效