高迁移率族蛋白B 1诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的受体机制

摘要

目的了解高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响及其受体机制。方法分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,在巨噬细胞中加入不同的刺激物,分为HMGB1组:加入10μg/ml的HMGB1;HMGB1+抗晚期糖基化终末产物受体（RAGE）组:先加入RAGE多克隆抗体5μg/ml孵育2h后,再加入HMGB1;HMGB1+重组鼠（rm）RAGE/Fc组:将10μg/ml的HMGB1与10μg/ml的rmRAGE/Fc混合作用2h后,再加入巨噬细胞;对照组:加入磷酸盐缓冲液。采用流式细胞仪检测细胞表面RAGE的表达强度。激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果HMGB1组RAGE阳性细胞率（54±12）%明显高于对照组[（13±5）%,P＜0.01],其荧光强度（126±10）也显著高于对照组（34±8,P＜0.01）。HMGB1+rmRAGE/Fc组、HMGB1+抗RAGE组凋亡细胞明显多于对照组,而HMGB1组晚期凋亡及坏死细胞明显多于其他3组。HMGB1组细胞凋亡率（39.5±2.3）%高于HMGB1+rmRAGE/Fc组[（17.3±3.6）%]、HMGB1+抗RAGE组[（14.8±4.8）%]及对照组[（5.4±2.3）%,P＜0.01]。结论HMGB1可诱导RAGE表达上调,RAGE是HMGB1诱导巨噬细胞凋亡的主要受体之一。