负压封闭引流治疗小鼠创面铜绿假单胞菌感染的效果及机制

摘要

目的观察VSD对感染创面中铜绿假单胞菌生长的影响,并探讨其可能机制。方法选取健康成年雄性C57BL/6小鼠40只,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组20只。无菌条件下切除各小鼠背部1 cm×1 cm的全层皮肤,将细菌荧光素酶目的基因luxCDABE标记的野生型铜绿假单胞菌菌株PAO1-lux涂抹于创面,包扎创面24 h,制成铜绿假单胞菌感染小鼠模型。治疗组小鼠创面行VSD治疗（负压为-16.625 kPa）,对照组创面常规换药。分别于治疗前和治疗24 h时,用小动物活体成像系统检测2组小鼠创面PAO1-lux荧光强度,激光多普勒血流成像仪检测创面血流量,以实时荧光定量RT-PCR检测创缘组织IL-1β、血管内皮生长因子（VEGF）的mRNA表达水平。观察治疗24 h时2组小鼠创缘组织病理学特点。对实验数据行t检验。结果 （1）治疗前,治疗组小鼠创面PAO1-lux荧光强度与对照组相近（t=0.03,P=0.98）;治疗24 h时,治疗组的荧光强度为（2.69±0.75）光子·秒-1·厘米-2·单位角度-1(photons·s-1·cm-2·sr-1),明显低于对照组的（5.18±0.96）photons·s-1·cm-2·sr-1,t=3.54,P=0.02。（2）治疗前,治疗组小鼠创面血流量与对照组相似（t=0.50,P=0.64）;治疗24 h时,治疗组创面血流量为（96±9）灌注单位,明显高于对照组的（70±11）灌注单位,t=3.13,P=0.04。（3）治疗前,2组小鼠创缘皮肤组织中IL-1β、VEGFmRNA表达水平接近（t=0.19,P=0.86;t=0.07,P=0.95）;治疗24 h时,治疗组IL-1β、VEGFmRNA表达水平分别为4.72±0.37、2.68±0.39,均明显高于对照组的2.24±0.50、1.22±0.13,t值分别为6.90、6.12,P值均为0.00。（4）治疗24 h时,治疗组创缘皮肤组织内炎性细胞浸润数量较对照组增加约77%。结论与常规换药相比,VSD治疗在小鼠全层皮肤缺损早期即能明显降低创面铜绿假单胞菌含量。其机制可能与增加创面局部血流量、提高创面组织炎性细胞数量、促进IL-1β和VEGF的mRNA表达有关。