大鼠股薄肌早期压疮局部腺苷三磷酸酶活性与兰尼碱受体1 mRNA表达

摘要

目的了解ATP酶活性与兰尼碱受体1（RyR1）mRNA表达变化在早期压疮形成过程中的作用机制。方法将36只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为3组,每组12只:（1）未施压组,大鼠股薄肌部位未施予压强。（2）3次缺血再灌注（IR）组,用特制压力装置对大鼠一侧大腿股薄肌持续施压（22.47 kPa）2.0 h模拟缺血状态,继而停止施压0.5 h模拟再灌注变化,如此进行3次即完成3个IR循环。（3）5次IR组,处理条件同3次IR组但重复操作5次。处理结束后处死各组大鼠,取受压中心（未施压组取相同解剖部位）肌肉组织标本,用比色法检测总ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活性,用ELISA法检测丙二醛含量,实时荧光定量RT-PCR法测定RyR1 mRNA表达水平。对实验数据行单因素方差分析,用Pearson相关分析法分析总ATP酶活性分别与丙二醛含量、RyR1 mRNA表达水平的相关性,RyR1 mRNA表达水平与丙二醛含量的相关性。结果未施压组总ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶活性分别为（1.629±0.004）、（0.907±0.061）、（0.697±0.083）U/mg,均高于3次IR组[（1.365±0.004）、（0.784±0.020）、（0.581±0.017）U/mg,F值分别为1707.0、29.8、15.2,P＜0.05或P＜0.01]以及5次IR组[（1.055±0.049）、（0.619±0.016）、（0.436±0.039）U/mg,F值分别为1107.0、169.9、65.7,P值均小于0.01];5次IR组此3项指标明显低于3次IR组（F值分别为322.8、341.7、94.0,P值均小于0.01）。未施压组丙二醛含量为（7.5±0.6）nmoL/L,明显低于3次IR组[（9.9±0.6）nmoL/L,F=53.2,P＜0.01]和5次IR组[（13.7±1.3）nmoL/L,F=76.9,P＜0.01];后2组比较,差异有统计学意义（F=82.9,P＜0.01）。实时荧光定量RT-PCR结果表明,未施压组RyR1 mRNA表达水平为8.5±4.2,与3次IR组（3.3±2.1）接近（F=0.9,P＞0.05）,但明显高于5次IR组（0.6±0.5,F=23.6,P＜0.05）;5次IR组明显低于3次IR组（F=39.3,P＜0.05）。总ATP酶活性与丙二醛含量呈显著负相关,r=-0.918,P＜0.01;总ATP酶活性与RyR1 mRNA表达水平呈显著正相关,r=0.713,P＜0.01;RyR1 mRNA表达水平与丙二醛含量呈显著负相关,r=-0.702,P＜0.01。结论能量代谢障碍可能是早期压疮发生的始动因素;RyR1 mRNA表达降低初步反映局部组织受压一定时间后存在钙超载损伤。