大鼠烫伤创面感染模型的研制

摘要

目的拟建立稳定的大鼠烫伤创面感染模型,以便于进行相关防治研究。方法 （1）取50只SD大鼠,使用恒温恒压烫伤仪,以底面积4.5 cm~2、质量0.5kg的80℃圆柱形烫头垂直接触大鼠脊柱左右两侧皮肤,致伤4、6、8、10、12 s（每种致伤时间10只大鼠,左右侧烫伤时间相同）制作烫伤模型。伤后24h,观察创面大体情况,记录左侧创面愈合时间,取右侧创面组织行组织学观察,根据结果筛选浅Ⅱ度、深Ⅱ度创面致伤时间。（2）另取36只SD大鼠,按随机数字表法分为浅Ⅱ度组、深Ⅱ度组,每组18只,按照前述方法与选定的致伤时间分别制成浅Ⅱ度、深Ⅱ度烫伤创面。伤后即刻在2组大鼠一侧创面分别接种0.1mL含1×10~9、1×10~7、1×10~5CFU铜绿假单胞菌标准菌株ATCC 27853的菌液（每种菌量6只大鼠）,在另一侧创面涂抹等体积生理盐水作为对照。接种细菌后24h HE染色观察创面炎症反应情况;接种细菌后1、2、3、5、7、14 d进行革兰染色及生化反应鉴定菌种,检测并计算痂下细菌含量;记录2组大鼠创面愈合时间。对数据行t检验。结果 （1）根据大鼠创面愈合时间及组织学检查结果 ,筛选出烫伤6s和8s分别为浅Ⅱ度和深Ⅱ度创面的致伤时间。（2）浅Ⅱ度组大鼠仅接种1×10~9CFU细菌的创面有少许炎性细胞浸润;深Ⅱ度组接种1×10~9、1×10~7CFU细菌创面均有炎性细胞浸润,前者浸润更明显。（3）创面细菌鉴定结果为铜绿假单胞菌。浅Ⅱ度组创面接种各种菌量后14 d内,痂下细菌含量绝大多数低于1×10~5CFU/g;深Ⅱ度组创面接种1×10~9 CFU细菌后14 d内,痂下细菌含量均高于1×10~5CFU/g并呈持续上升趋势。（4）浅Ⅱ度组接种1×10~9、1×10~7、1×10~5 CFU细菌的创面与生理盐水对照创面愈合时间相近（t值分别为1.26、0.29、1.07,P值均大于0.05）;深Ⅱ度组接种1×10~9 CFU细菌创面愈合时间[（22.5±1.0）d]较生理盐水对照创面[（19.4±1.6）d]明显延长（t=2.73,P＜0.05）。结论大鼠深Ⅱ度烫伤创面接种1×10~9CFU铜绿假单胞菌标准菌株ATCC 27853,可作为感染创面防治研究的实验模型,该模型稳定、重复性较高。