缺锌对内毒素/脂多糖所致脓毒症大鼠相关免疫功能的影响

摘要

目的观察缺锌对LPS所致脓毒症大鼠相关免疫功能的影响。方法将60只大鼠按随机数字表法分为低锌组、常锌配饲组、常锌对照组,每组20只。低锌组大鼠进食低锌饲料;常锌配饲组大鼠进食正常含锌饲料,并通过人工控制使其进食量与低锌组大鼠相同;常锌对照组大鼠自由进食正常含锌饲料。饲养7 d后禁食,按随机数字表法将前述3组大鼠组内依次分为低锌LPS亚组、低锌生理盐水（NS）亚组,常锌配饲LPS亚组、常锌配饲NS亚组,常锌对照LPS亚组、常锌对照NS亚组,每组10只。各LPS亚组大鼠腹腔注射1 mg/mL LPS（5 mg/kg）,各NS亚组大鼠腹腔注射等量NS。注射6 h后各组大鼠断头取血并留取脾脏、胸腺。采用电感耦合等离子体质谱仪检测血清锌含量,采用血生化自动分析仪检测血清碱性磷酸酶（ALP）活性,称量各亚组大鼠体质量、胸腺及脾脏的质量并计算脾脏指数和胸腺指数,采用全自动血细胞分析仪检测6项血常规指标,ELISA法检测血清γ干扰素、IL-4、TNF-α、IL-10含量并计算γ干扰素/IL-4比值。对数据行单因素方差分析、SNK检验。结果（1）血清锌含量、ALP活性:各LPS亚组大鼠均显著低于相应的NS亚组,常锌配饲NS亚组、常锌对照NS亚组大鼠均显著高于低锌NS亚组,常锌配饲LPS亚组、常锌对照LPS亚组大鼠均显著高于低锌LPS亚组,P值均小于0.05。（2）体质量、脾脏质量、脾脏指数、胸腺质量、胸腺指数:各LPS亚组大鼠与相应的NS亚组相近（P值均大于0.05）;除体质量外,常锌配饲NS亚组、常锌对照NS亚组大鼠余指标均显著高于低锌NS亚组,常锌配饲LPS亚组、常锌对照LPS亚组余指标均显著高于低锌LPS亚组,P值均小于0.05。（3）白细胞计数:低锌LPS亚组、常锌配饲LPS亚组大鼠显著高于相应的NS亚组（P值均小于0.05）,常锌对照NS亚组大鼠显著高于低锌NS亚组（P＜0.05）,常锌对照LPS亚组大鼠显著低于低锌LPS亚组（P＜0.05）。中性粒细胞计数及中性粒细胞:各LPS亚组大鼠均显著高于相应的NS亚组（P值均小于0.05）,常锌对照LPS亚组大鼠显著低于低锌LPS亚组（P值均小于0.05）;常锌对照NS亚组大鼠中性粒细胞显著低于低锌NS亚组（P＜0.05）。淋巴细胞计数及淋巴细胞:低锌NS亚组、低锌LPS亚组、常锌配饲NS亚组、常锌配饲LPS亚组、常锌对照NS亚组、常锌对照LPS亚组大鼠淋巴细胞计数分别为（1.8±0.4）×10~9/L、（1.0±0.3）×10~9/L、（2.6±0.7）×10~9/L、（1.4±0.4）×10~9/L、（3.3±0.6）×10~9/L、（1.5±0.5）×10~9/L,淋巴细胞分别为0.39±0.10、0.11±0.03、0.47±0.12、0.14±0.04、0.50±0.09、0.24±0.07,各LPS亚组大鼠均显著低于相应的NS亚组,常锌对照NS亚组大鼠均显著高于低锌NS亚组,常锌配饲LPS亚组、常锌对照LPS亚组大鼠显著高于低锌LPS亚组,P值均小于0.05;常锌配饲NS亚组大鼠淋巴细胞计数显著高于低锌NS亚组（P＜0.05）。血小板计数:常锌配饲LPS亚组、常锌对照LPS亚组大鼠显著低于相应的NS亚组（P值均小于0.05）,常锌配饲NS亚组、常锌对照NS亚组大鼠显著高于低锌NS亚组（P值均小于0.05）,常锌对照LPS亚组大鼠显著高于低锌LPS亚组（P＜0.05）。（4）各组大鼠血清TNF-α、IL-4、IL-10含量相近（P值均大于0.05）。血清γ干扰素含量及γ干扰素/IL-4比值:低锌NS亚组、低锌LPS亚组、常锌配饲NS亚组、常锌配饲LPS亚组、常锌对照NS亚组、常锌对照LPS亚组血清γ干扰素含量分别为（75±21）、（233±40）、（80±14）、（345±74）、（66±7）、（821±189）pg/mL,γ干扰素/IL-4比值分别为3.1±1.0、6.6±1.7、3.9±1.7、20.2±8.3、3.4±1.5、45.7±7.6,各LPS亚组大鼠均显著高于相应的NS亚组（P值均小于0.05）,常锌配饲NS亚组、常锌对照NS亚组大鼠与低锌NS亚组相近（P值均大于0.05）,常锌配饲LPS亚组、常锌对照LPS亚组大鼠均显著高于低锌LPS亚组（P值均小于0.05）。结论锌缺乏可造成月龄大鼠胸腺、脾脏萎缩,外周血淋巴细胞减少,在脓毒症状态下,γ干扰素产生进一步减少,从而使Th1/Th2细胞因子发生了向Th2漂移,加剧免疫功能失衡。