细胞骨架蛋白4荧光免疫层析检测方法的建立

摘要

采用基于免疫层析技术与荧光微球标记技术相结合的方式,建立一种快速、简单的定量检测肝癌肿瘤标记物的方法.依据双抗体夹心原理,将细胞骨架蛋白4 (CKAP4)配对抗体分别作为标记与包被抗体,羊抗兔多抗作为质控线包被抗体,制备CKAP4荧光免疫层析试纸条,并对试纸条的线性、精密性、稳定性等各项性能指标进行评价.结果 表明,采用时间分辨荧光微球所制备的CKAP4免疫层析试纸条灵敏度高,特异性好,精密性在15％以内,回收率在85％-115％之间,线性范围为25-1 000 pg/mL,可在37℃稳定保存20 d,与商业化的ELISA试剂盒的相关性良好.结论:初步建立了CKAP4荧光免疫层析方法,能够定量检测血清中CKAP4的含量,且具有快速、灵敏、简便、经济、可单人份操作等优点,有望成为肝癌辅助诊疗的新方法.