应用电激法在大肠杆菌中导入外源性DNA

摘要

本文报道用国产基因导入脉冲仪(LN-101型),采用高压脉冲电场,将质粒DNA和噬菌体DNA成功地转化或转导入大肠杆菌。该电场单次电压脉冲范围1.0kV—2.5kV(初电场强度2.8kV/cm—16kV/cm)、电容范围5—20μF,用质粒pUC18和受体菌株DH5α,获得10~9—10^(10)转化子/μgDNA。电场强度、电容及脉冲时间等不同的因素影响转化效率。转化率与DNA的强度呈线性关系,与受体细胞密度成正比。DNA和受体菌混合物在电激前、后的孵育时间,对转化效率影响不明显。用噬菌体M13mp 19 RF及受体菌株JM109,同样可获得较高的转化效率。