新型表达载体pEC34试用于人γ—干扰素基因的高表达

摘要

构建了一个新的双顺反子表达载体ｐＥＣ３４，它的第一个顺反子是已高表达的ｅｒａ基因的部分序列，并带有原核翻译增强子。当检测ｐＥＣ３４的可用性时，获得了人γ－干扰素的极高表达。目的蛋白占菌体总蛋白的８５．５％，诱导后经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，出现分子量为１５．５ｋＤａ左右的蛋白表达带。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ结果证实为人γ－干扰素。无压力传代３０次表达质粒仍然稳定，表明ｐＥＣ３４可能用作真核蛋白质高表达