猪链球菌IgG结合蛋白的原核表达及其与不同动物IgG的结合性

摘要

猪链球菌IgG结合蛋白(SPG)是一种可与多种动物IgG结合的细胞壁蛋白,广泛地存在于猪链球菌的各个血清型中,被认为是共同抗原.然而其在猪链球菌中的生物学意义并不清楚.本实验用PCR方法从猪链球菌1/2、1、2和9型菌株基因组中扩增SPG基因,构建pET28a-SPG重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21菌株.IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blotting鉴定为可高效表达.镍亲和层析及分子筛两步纯化后获得纯度较高的目的蛋白.Western blotting及ELISA试验结果表明,所有纯化的目的蛋白均可与不同动物IgG结合,其中与人和猪IgG的结合能力相对较高,但不同血清型猪链球菌SPG与同种动物IgG的结合活性没有明显差异.