PHD finger protein 8蛋白多克隆抗体的制备、纯化与检测

摘要

PHD finger8(PHF8)蛋白是最新发现的一种带有PHD结构域和Jmjc结构域的蛋白.现有研究表明其可能在基因转录、组蛋白去甲基化等方面发挥重要作用.为研究其功能,本研究构建原核表达载体pET41b-PHF8 faa886-936),在大肠杆菌Escherichia coli BL21中诱导表达带有GST标签的PHF8(aa886-936)亲水片段融合蛋白,并纯化该片段作为抗原免疫家兔,再以CNBr活化Sepharose 4B微珠纯化抗血清制备PHF8特异性多克隆抗体.Western blotting以及免疫荧光检测表明该抗体具有很好的特异性,同时免疫荧光染色的结果也表明PHF8蛋白定位于细胞核.