利用溶氧调控型启动子Pvgb构建产surfactin的重组枯草芽孢杆菌

摘要

表面活性素(surfactin)在石油开采、环境修复及医药卫生等行业应用广泛,但在生产过程中存在产生大量泡沫的难题.本文中,笔者尝试通过溶氧水平来调控surfactin的合成.溶氧诱导型启动子Pvgb使得目的基因受到溶氧水平的表达调控.以绿色荧光蛋白GFP为报告基因,考察Pvgb及其串联多拷贝启动子在枯草芽孢杆菌168菌株中的转录水平,结果发现,Pvgb启动子为组成型弱启动子,对溶氧水平的响应强度并不显著,Pvgb的拷贝数对表达水平具有"剂量效应",增加拷贝数,表达量增加.将不同拷贝数的Pvgb启动子以及强启动子P43分别构建回补Sfp功能蛋白的可产surfactin的B.subtilis168重组菌株,结果表明,Sfp功能蛋白的表达强度不是影响surfactin合成量的关键因素,溶氧供给水平是影响surfactin合成的关键因素.