过量表达自身hemA基因的重组大肠杆菌发酵生产5-氨基乙酰丙酸的研究

摘要

研究了优化重组大肠杆菌产5-氨基乙酰丙酸(ALA)的条件, 提高大肠杆菌发酵生产ALA的产量.在测定重组大肠杆菌GT48的生长曲线的基础上,确定诱导时间,优化摇瓶发酵条件.然后,进一步在5 L发酵罐上进行间歇和流加发酵研究.摇瓶实验表明,细胞培养最佳初始pH为6.5,最佳诱导时间为稳定期前期,最佳接种量为2%,过高的葡萄糖浓度对细胞生长和产物合成均有一定的抑制作用.在5 L发酵罐间歇发酵中,重组菌产ALA能力达到47.8 mg/L.采用流加发酵可以进一步将产物产量提高到63.8 mg/L. 构建的过量表达自身的hemA基因的大肠杆菌具有较高的产ALA能力,通过发酵条件优化和采用流加发酵可以提高ALA产量.