长链非编码RNA MEF2C-AS1通过下调miR-3646的表达抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的功能机制研究

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MEF2C-AS1提高调控miR-3646表达对乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的功能影响和机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常乳腺细胞HBL-100和4种乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468)中MEF2C-AS1和miR-3646的相对表达水平.以MCF-7细胞为研究对象,分别建立过表达MEF2C-AS1或抑制miR-3646表达的MCF-7细胞株,MTT法检测细胞活力,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力,蛋白免疫印迹(Western blotting)检测增殖相关蛋白CDK1和迁移侵袭相关蛋白MMP-2的表达水平.双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR检测验证MEF2C-AS1和miR-3646的靶向关系.结果 与正常乳腺细胞HBL-100相比,4种乳腺癌细胞中MEF2C-AS1的表达均显著下调,miR-3646的表达均显著上调(P<0.05).过表达MEF2C-AS1或抑制miR-3646表达均可抑制MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制CDK1和MMP-2蛋白的表达.miR-3646是MEF2C-AS1的靶基因,MEF2C-AS1可负性调控miR-3646的表达.过表达miR-3646可逆转MEF2C-AS1对MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用.结论 MEF2C-AS1通过靶向下调miR-3646抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与抑制CDK1和MMP-2蛋白表达有关.