哈茨木霉S30胞外几丁质酶的纯化及特性

摘要

哈茨木霉 S30在 SMCS液体培养基中恒温摇床 ( 2 0 0 r/ min,2 7.5℃ )上培养 1 5天 ,培养滤液经硫酸铵分级沉淀、DEAE- Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析、Phenyl- SepharoseFast Flow疏水层析、CM- Sepharose Fast Flow阳离子柱层析、Phenyl- Sepharose HP疏水柱层析获得了凝胶电泳谱带单一的几丁质酶。几丁质酶反应的最适温度为 40℃ ,最适 p H值为5 .0。 70℃下保温 1 0分钟后 ,该酶仍保持一定剩余活力 ,说明其耐温性较强。金属离子存在对酶活性有显著影响 ,Mg2 +、Ba2 +、Mn2 +对酶有激活作用 ,其中以 Mg2 +作用最强。