刺糖多孢菌bldD基因过表达对多杀菌素合成及其孢子形成的影响

摘要

bldD基因是链霉菌中的全局性调控基因,调节菌体的形态分化与次级代谢产物的合成.本研究采用重叠延伸PCR将bldD基因置于红霉素强启动子（RermE）的控制下克隆至大肠杆菌-链霉菌穿梭载体pUC-spn上,构建重组载体pUC-spn-PermE-bldD;通过接合转移将其导入刺糖多孢菌中,获得遗传性能稳定的重组菌株S.spinosa-BldD.平板培养观察发现,在BHI和TSB平板上,重组菌株的孢子形成受到明显抑制.摇瓶发酵结果显示,重组菌株多杀菌素产量相比对照菌株提高了1.35倍.因此,bldD基因的过量表达在一定程度上抑制刺糖多孢菌的孢子形成,并有效促进多杀菌素的生物合成,为研究其他正调控基因的过量表达促进多杀菌素的生物合成奠定了重要基础.