来源于豆豉的纳豆激酶基因在大肠杆菌中活性表达研究

摘要

目的构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,实现纳豆激酶基因(nattokinase gene)在大肠杆菌中高活性表达.方法以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,采用PCR方法分别扩增编码前肽、成熟肽的序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566.在IPTG诱导下,分别在37℃(2 h)、30℃(3 h)和15℃(14 h)培养.结果pTYB102能表达有活性的纳豆激酶.SDS-PAGE表明,15℃表达杂蛋白质更少.结论证明具有77个氨基酸序列的前肽(pro序列)对纳豆激酶的活性表达是必不可少的.