高效液相色谱法测定酶促反应液中的L-半胱氨酸含量

摘要

目的 建立高效液相色谱法检测酶促反应液中L-半胱氨酸含量.方法 采用异硫氰酸苯酯柱前衍生高效液相色谱法测定.色谱柱:Waters Symmetry C18(5 μm,250 mm×4.6 mm);流动相A:醋酸钠缓冲溶液-乙腈(40:3),流动相B:乙腈-水(4:1);梯度洗脱,流速1.0 mL/min;柱温38 ℃;检测波长254 nm.结果 线性范围为0.01～0.1 mg/mL,r=0.999 5(n=6);平均回收率为100.03%,RSD为0.21%(n=6).结论 此法简便易行,重现性好.