IL-10抑制脂多糖诱导的Hela细胞IL-15和IL-6转录

摘要

目的 研究IL-10对脂多糖(LPS)诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6mRNA表达的影响,分析其激活的信号转导通路.方法 培养的Hela细胞,经不同浓度的LPS及IL-10单独或联合处理后,提取细胞总RNA和总蛋白,RT-PCR分析IL-15和IL-6转录水平的变化,Western blot分析信号转导通路蛋白变化.结果 RT-PCR分析得知①1 ng～10 μg LPS刺激Hela细胞12 h后,IL-15mRNA和IL-6mRNA水平均明显上调(与对照组比较:P＜0.01),且存在剂量依赖关系,100 ng/mL时达峰值;100 ng/mL LPS刺激Hela细胞0～24 h,IL-15mRNA和IL-6mRNA水平亦明显上调(与对照组比较:P＜0.01),24 h内存在时间依赖关系,12 h时达峰值.②单独IL-10(10 ng/mL)作用于Heh细胞12 h后,IL-15mRNA和IL-6mRNA没有明显变化(与对照组比较:P＞0.05).不同浓度的IL-10(1,10,100 ng/mL)均下调100 ng/mL LPS诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6mRNA的表达,且浓度越高IL-10抑制作用越明显.Western blot 分析显示LPS主要通过磷酸化信号蛋白PI3K/AKT和ERK1/2上调IL-15和IL-6转录,IL-10能阻断AKT的磷酸化而对ERK1/2的磷酸化没有影响.结论 IL-10可抑制LPS诱导的炎症细胞因子IL-15和IL-6的转录,这可能与其阻断AKT的磷酸化有关,因而,IL-10可能应用于某些临床感染性疾病的预防和治疗.