补肾活血汤调控Runx2及Osterix促进BMSCs成骨分化的作用研究

摘要

目的:探讨补肾活血汤提高骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal cells,BMSCs) Runx2及Osterix基因表达,促进成骨分化的作用.方法:从双侧股骨和胫骨分离大鼠BMSCs并使用腺病毒载体转染BMSCs细胞,构建过表达Runx2细胞株,Q-PCR法对转染细胞株进行鉴定,CCK8法评价补肾活血汤对BMSCs活性的影响,ALP半定量活性检测法评价补肾活血汤对BMSCs成骨分化的影响,RT-PCR、Western Blot法检测补肾活血汤对成骨相关标志物Runx2和Osterix表达量的影响.结果:成功构建过表达Runx2的BMSCs细胞,补肾活血汤组在25 μg/m-200 μg/ml之内对细胞活性没有影响,与正常培养组比较补肾活血汤100 μg/ml组ALP活性显著提高,与正常培养组比较补肾活血汤50 μg/ml、100 μg/ml组Runx2和Osterix的mRNA和蛋白相对表达量显著增加.结论:补肾活血汤能提高BMSCs中Runx2和Osterix的表达,促进成骨分化.