用荧光指示剂Fura－2测定正常和电刺激后蛙肌胞浆自由Ca^（2＋）浓度

摘要

蛙半腱肌肌束负载Ｆｕｒａ－２／ＡＭ后，可用荧光信号Ｆ３４０、３８０ｎｍ波长比值（Ｒ３４０／３８０）反映胞浆内游离Ｃａ２＋浓度（〔Ｃａ２＋〕）。利用这一技术，我们发现长时间电刺激后的骨骼肌〔Ｃａ２＋〕，高于未刺激肌，Ｒ３４０／３８０分别为１．４９±０．５４（ｎ＝１０）和１．０２±０．２６（ｎ＝１０）。加入Ｃａ２＋载体伊屋诺霉素（ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ，１μｍｏｌ／Ｌ）后，正常肌与电刺激肌〔Ｃａ２＋〕，均上升，但刺激肌上升幅度低，持续时间短。说明电刺激至力竭后，细胞内有较多的Ｃａ２＋负载。增加细胞外Ｃａ２＋浓度至１５ｍｍｏｌ／Ｌ，〔Ｃａ２＋〕ｉ下降。而给予Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换阻断剂奎尼丁（１０４ｍｏｌ／Ｌ）后，正常肌〔Ｃａ２＋〕ｉ上升，刺激肌〔Ｃａ２＋〕ｉ下降。结果提示：Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换是正常骨胳肌外排Ｃａ２＋的途径之一；而长时间肌肉活动则可能使细胞膜Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换方式改变，从而导致力竭肌〔Ｃａ２＋〕ｉ上升。